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儀器：
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀（比色測定波長為550nm）
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理：
血清（漿）可直接測定。
紅細胞：需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測定。
培養細胞、細菌、植物組織：常用PBS作為勻漿介質破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理：參考我們隨貨發送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。

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測定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣，不能加在管壁上
4.加樣時不能產生氣泡
2.加溫
1.加標本后和加結合物后，應立即放入按規定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發，板上應加蓋，或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后，反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當時，即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟，但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。
優點如下：
1、快速簡便：全程約50分鐘，可測100例左右樣本。
2、取樣量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可測紅細胞中的SOD，只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD，0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高：IC50=0.05g/ml，是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩定性好：試劑盒2～8℃存放6個月有效。
5、再現性好：變異系數CV=1.7%。
6、回收試驗： X =103.3%。
7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少，重復性強。
8、測試面廣：可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養細胞、細菌、植物組織、各種水產以及化妝品、保健品等，效果均佳。
LAYN Others Rat 大鼠 Layilin / LAYN 人細胞裂解液 (陽性對照) 洋川芎內酯I(標準品)質量規格：HPLC≥98%,標準品Senkyunolide I

成骨細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)洋川芎內酯H(標準品)質量規格：HPLC≥98%,標準品Senkyunolide H

HCC-9204細胞，肝癌細胞 人細胞,HeLa細胞 人角膜上皮細胞cDNAHCEpiC cDNAINCB28060質量規格：>98,ATP競爭性的c-MET抑制劑INCB-28060

非洲綠猴腎細胞;BS-C-1氨芬酸鈉質量規格：>99%Amfenac

CSF3R Others Human 人 CD114 / G-CSFR / GCSFR 人細胞裂解液 (陽性對照) 桑皮苷A（標準品）質量規格：HPLC≥98%，標準品Mulberroside A
MET Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 c-MET / HGFR 人細胞裂解液 (陽性對照) FCLA 自由酸[化學發光試劑]FCLA Free Acid質量規格：化學發光試劑

人成骨肉瘤細胞;MG-63紅-CLA(含氮量：9.00-10.30 %)Red-CLA質量規格：含氮量：9.00-10.30 %

豚鼠心肌細胞;GP-H1 EBV 轉化的絨猴白細胞，B95-8細胞 MEL細胞，小鼠紅白血病細胞13-乙基-18,19-二去-17α-pregn-4-en-20-yn-17-ol(左炔諾孕酮雜質D)13-Ethyl-18,19-dinor-17α-pregn-4-en-20-yn-17-ol(Levonorgestrel Impurity D)質量規格：美國進口

人胚肺成纖維細胞;MRC-513-乙基-17-羥基-18,19-dinor-17α-pregn-5(10)-en-20-yn-3-one(左炔諾孕酮雜質B)13-Ethyl-17-hydroxy-18,19-dinor-17α-pregn-5(10)-en-20-yn-3-one(Levonorgestrel Impurity B)質量規格：美國進口

SIRPA Others Human 人 SIRPA / CD172A 人細胞裂解液 (陽性對照) 17-去乙酰基諾孕酯17-Desacetyl Norgestimate質量規格：美國進口
小鼠色素瘤瘤株;B16 小鼠皮膚肥大細胞*培養基 100mL福氏*佐劑容量：1公斤

H9c2大鼠心肌細胞(ATCC來源) Rattus2,2-二氧基-2-本基本同 2,2-Dimqthoxy-2-phqnylccqtophqnonq 4620/4/8

EFNA4 Others Mouse 小鼠 EFNA4 / Ephrin-A4 人細胞裂解液 (陽性對照) 人造沸石容量：RT25克

人內皮細胞HLEC容量：RT1克

CDH17 Others Rat 大鼠 Cadherin-17 / LI-cadherin / CDH17 人細胞裂解液 (陽性對照) 54827-17-73,3',5,5'-四聯本胺3 3' 5 5'-TETRAmetxYLBENZIDINE FREE BASE
2/15ml磁力架LAYN Others Rat 大鼠 Layilin / LAYN 人細胞裂解液 (陽性對照) 擬人參皂苷F11(標準品)Pseudoginsenoside F11質量規格：HPLC≥98%，標準品

CM-H042人肝內膽管上皮細胞*培養基100mL擬人參皂苷RT5(標準品)Pseudoginsenoside RT5質量規格：HPLC≥98%，標準品

HCT116細胞，人結直腸癌細胞 人色素瘤細胞,HME1細胞 人胚肺二倍體細胞;KMB-17尿囊素（標準品）Allantoin質量規格：HPLC≥98%，標準品

GBC-SD(人膽囊癌細胞) 5×106cells/瓶×2檸檬苦素；吳茱萸內酯(標準品,吳茱萸提取)Limonin質量規格：HPLC≥98%，標準品,吳茱萸提取

BACE1 Others Mouse 小鼠 BACE-1 人細胞裂解液 (陽性對照) 檸檬苦素，黃柏內酯(標準品,橙皮提取) Limonin質量規格：HPLC≥98%,標準品,橙皮提取
實驗通用規則：
1、洗液不夠時，可用蒸餾水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸緩沖液，加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
2、液體全部加完后，可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒，混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。
3、底物有一定的毒性，終止液對皮膚有腐蝕性，應盡量避免接觸。
4、檢測前，要打開酶標儀，使之穩定10分鐘以上。
5、吸取液體時，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。
6、將液體加到酶標孔中時，避免槍頭和孔內液體接觸，可使槍頭上的液滴和孔壁接觸，液滴會自然流下去。
7、溫浴時，要用不干膠或膠帶紙封好酶標板，防止水分的蒸發。
8、洗板時，每次洗液加入后，應靜置1分鐘，使清洗更加*。沒有洗板機時，倒去液體后，要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時速度不能太快，以免產生氣泡而使吸取量不準確。
10、底物是光敏感的，要在臨用前現配。