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儀器：
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀（比色測定波長為550nm）
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理：
血清（漿）可直接測定。
紅細胞：需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測定。
培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織：常用PBS作為勻漿介質破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理：參考我們隨貨發(fā)送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。

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測定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣，不能加在管壁上
4.加樣時不能產生氣泡
2.加溫
1.加標本后和加結合物后，應立即放入按規(guī)定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發(fā)，板上應加蓋，或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后，反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當時，即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟，但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。
優(yōu)點如下：
1、快速簡便：全程約50分鐘，可測100例左右樣本。
2、取樣量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可測紅細胞中的SOD，只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD，0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高：IC50=0.05g/ml，是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好：試劑盒2～8℃存放6個月有效。
5、再現(xiàn)性好：變異系數(shù)CV=1.7%。
6、回收試驗： X =103.3%。
7、受外界影響因素小：干擾因素少，重復性強。
8、測試面廣：可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織、各種水產以及化妝品、保健品等，效果均佳。
人羊膜上皮細胞RNAHAmEpiC miRNA5 μg雌激素酮硫酸鹽，去氫表雄酮*質量規(guī)格：>98%Dehydroepiandrosterone-3-sulfate

SELP Others Mouse 小鼠 SELP / selectin P / P-selectin 人細胞裂解液 (陽性對照) 纈更昔洛韋鹽酸鹽 質量規(guī)格：>99%,USPValganciclovir

SV40轉化的非洲猴腎細胞;COS-1肌醇質量規(guī)格：>99%,BRInositol

CL187/CCL187細胞，人大腸癌細胞 人色素瘤細胞,M14細胞 人多發(fā)性骨髓瘤細胞;RPMI-8226 [RPMI8826]肌醇(標準品)質量規(guī)格：>99%,標準品Inositol

Hela(人細胞) 5×106cells/瓶×24'-羥基氟比洛芬質量規(guī)格：美國進口4'-Hydroxy Flurbiprofen
GBC-SD 人膽囊癌細胞兔肌動蛋白25克RT

RKO人結腸腺癌細胞 RKO human colon adenocarcinoma cells 1640+10%FBS霍亂 Cholera toxin from Vibrio cholerae 9012-63-9 0.5MG 通用試劑

TNFSF9 Protein Rat 重組大鼠 4-1BBL / CD137L / TNFSF9 蛋白 (Fc 標簽

人卵巢成纖維細胞(HOF) ( 5×105 ) NCI-N87 [N87]人胃癌細胞 Human鹽酸土霉素100克

EB病毒轉化的人B細胞;KMY0923SS瓊脂Agar-S.S
HCMEC-c 人類心臟微血管內皮細胞(HCMEC) 500,000cells 腦靜脈血管平滑肌細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)（標準品）Hydrocortisone質量規(guī)格：HPLC>98%,標準品

神經膠質細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)富馬酸伊布利特Ibutilide fumarate 質量規(guī)格：>99%,BR

SORCS1 Others Human 人 SORCS1 人細胞裂解液 (陽性對照) 富馬酸伊布利特(標準品)Ibutilide fumarate 質量規(guī)格：HPLC≥98%,標準品

Oregon vole 俄勒岡地鼠硫酸異帕米星Isepamicine Sulphate質量規(guī)格：含量≥670µg/mg

豬腎細胞;PK(15)蓓薩羅丁;貝沙羅汀Bexarotene質量規(guī)格：>99%
鋅Zn含量測定試劑盒RKO人結腸腺癌細胞 RKO human colon adenocarcinoma cells 1640+10%FBS吡喹酮質量規(guī)格：>98.5%,BRPraziquantel

TNFSF9 Protein Rat 重組大鼠 4-1BBL / CD137L / TNFSF9 蛋白 (Fc 標簽)吡喹酮（標準品）質量規(guī)格：HPLC>98%,標準品Praziquantel

人卵巢成纖維細胞(HOF) ( 5×105 ) NCI-N87 [N87]人胃癌細胞 Human羥基1灰石質量規(guī)格：>99%,粒徑20nmHydroxyapatite

EB病毒轉化的人B細胞;KMY0923羥丙基纖維素(粘度11250-21000mPas)質量規(guī)格：粘度11250-21000mPasHydroxy Propyl Methyl Cellulose/HPMC K15M

XCL1 Others Mouse 小鼠 XCL1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 羥丙基纖維素質量規(guī)格：粘度55 - 60 mPa.sHydroxypropylmethylcellulose
實驗通用規(guī)則：
1、洗液不夠時，可用蒸餾水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸緩沖液，加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
2、液體全部加完后，可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒，混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。
3、底物有一定的毒性，終止液對皮膚有腐蝕性，應盡量避免接觸。
4、檢測前，要打開酶標儀，使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5、吸取液體時，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。
6、將液體加到酶標孔中時，避免槍頭和孔內液體接觸，可使槍頭上的液滴和孔壁接觸，液滴會自然流下去。
7、溫浴時，要用不干膠或膠帶紙封好酶標板，防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時，每次洗液加入后，應靜置1分鐘，使清洗更加*。沒有洗板機時，倒去液體后，要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時速度不能太快，以免產生氣泡而使吸取量不準確。
10、底物是光敏感的，要在臨用前現(xiàn)配。